期刊简介
本刊以弘扬和发展中国中医药事业为特色，以探讨研究中医药传统学术及中医药在现代医学领域的最新应用成果为重点，坚持“二为”方向、理论与实践并重，普及与提高相结合，讲求科学性与实用性。是从事中医药临床、教学、科研和中医药生产专业人员发表学术见解、报道科研成果、交流工作经验的园地，是广大中医药工作者及中医爱好者的良师益友。
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首页>时珍国医国药杂志
- 杂志名称：时珍国医国药杂志
- 主管单位：湖北省黄石市卫生局
- 主办单位：时珍国医国药杂志社
- 国际刊号：1008-0805
- 国内刊号：42-1436/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文核心期刊 美国化学文摘统计源期刊期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
香菇C91-3菌丝发酵液中蛋白的分离纯化及其抗肿瘤机理研究
武永红；黄敏；曹励民；李萍
关键词：发酵液, 香菇, 蛋白, 凝胶过滤层析法
摘要：目的 研究香菇C91-3菌丝体发酵液中的粗蛋白LFP91 -3的分离纯化方法,提取具有抗肿瘤活性的蛋白组分,并初步鉴定其药效及特性.方法 LFP91 -3经盐析、透析、Sephadex G - 100凝胶过滤层析分离.用考马斯亮蓝法测定各管收集液中的蛋白浓度,依此绘制洗脱曲线,按曲线对收集液分组；用MTT比色法分别测定各组蛋白收集液对肿瘤细胞的生长抑制作用.对抑瘤率大的一组各管收集液分别做SDS - PAGE电泳银染,取电泳条带相对较单一的峰尖部数管收集液合并,即为本实验的提取蛋白,以MTT比色法测定其对肿瘤细胞的生长抑制作用.用考马斯亮蓝法和硫酸-苯酚定糖法测定提取蛋白中蛋白和糖的比例.流式细胞仪检测提取蛋白诱导肿瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率；透射电镜观察经该蛋白作用的肿瘤细胞的凋亡形态.结果 LFP91 -3经分离纯化,可得Ⅰ～Ⅳ共4组蛋白峰,且第3组的收集液抑瘤率高.SDS - PAGE电泳结果显示第3峰顶部23～26管收集液主要含有19 kDa左右的蛋白,其他分子量的蛋白含量极低.测得该蛋白中蛋白和糖比例约为3∶1.MTT法显示提取蛋白在体外能明显抑制鼠肉瘤细胞株S180细胞的生长.流式细胞仪检测结果表明提取蛋白能在体外诱导S180细胞凋亡.透射电镜下,经提取蛋白作用的S180细胞,呈明显的凋亡形态.结论 粗蛋白LFP91 -3经盐析、透析、Sephadex G - 100凝胶过滤层析分离共得到4组蛋白,第3组对S180细胞的抑制作用强,其中第23～26管收集液主要含有分子量为19 kDa左右的蛋白,而且含有糖成分,提示可能为糖蛋白.该提取蛋白对S180细胞的生长具有较强的抑制作用,此作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关.
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