期刊简介

               本刊以弘扬和发展中国中医药事业为特色,以探讨研究中医药传统学术及中医药在现代医学领域的最新应用成果为重点,坚持“二为”方向、理论与实践并重,普及与提高相结合,讲求科学性与实用性。是从事中医药临床、教学、科研和中医药生产专业人员发表学术见解、报道科研成果、交流工作经验的园地,是广大中医药工作者及中医爱好者的良师益友。                

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  • 杂志名称:时珍国医国药杂志
  • 主管单位:湖北省黄石市卫生局
  • 主办单位:时珍国医国药杂志社
  • 国际刊号:1008-0805
  • 国内刊号:42-1436/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文核心期刊 美国化学文摘统计源期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
时珍国医国药杂志2014年第02期

罗汉果GAPDH基因的克隆及其在基因表达分析中的应用

余汇;蒋向军;覃宇燕;王骏;韩艺璇;吴琼

关键词:罗汉果, 甘油酸-3-磷酸脱氢酶, 内参基因, 实时荧光定量PCR
摘要:目的 克隆罗汉果甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH,EC 1.2.1.12)基因,分析其在基因表达定量研究中其作为内部参照基因的可行性.方法 采用同源克隆和cDNA末端快速克隆技术,以罗汉果cDNA为模板扩增GAPDH基因的保守区片段.结果 获得了罗汉果GAPDH保守区序列cDNA,命名为SgGAPDH(GenBank注册号:KC410810),序列长度为627 bp,编码209个氨基酸的多肽.系统发育分析表明,SgGAPDH属于植物甘油酸-3-磷酸脱氢酶家族.半定量PCR分析表明罗汉果GAPDH基因在不同组织中表达很稳定.以其作为内部参照基因,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了异戊烯基焦磷酸异构酶(Isopentenyl-diphosphate delta isomerase)的组织表达规律.结果显示SgGAPDH具有良好的扩增效果和重现性.结论 首次克隆了罗汉果GAPDH基因,明确了该序列在基因表达分析中的内参照作用,为罗汉果甜苷生物合成基因的研究提供了条件.