期刊简介

               本刊以弘扬和发展中国中医药事业为特色,以探讨研究中医药传统学术及中医药在现代医学领域的最新应用成果为重点,坚持“二为”方向、理论与实践并重,普及与提高相结合,讲求科学性与实用性。是从事中医药临床、教学、科研和中医药生产专业人员发表学术见解、报道科研成果、交流工作经验的园地,是广大中医药工作者及中医爱好者的良师益友。                

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  • 杂志名称:时珍国医国药杂志
  • 主管单位:湖北省黄石市卫生局
  • 主办单位:时珍国医国药杂志社
  • 国际刊号:1008-0805
  • 国内刊号:42-1436/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文核心期刊 美国化学文摘统计源期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
时珍国医国药杂志2017年第01期

滇重楼可溶性无机焦磷酸酶基因的克隆及原核表达研究

赵爽;董栩;许燕;李国栋

关键词:滇重楼, 可溶性无机焦磷酸酶, 基因克隆, 原核表达
摘要:目的 为了研究可溶性无机焦磷酸酶(soluble inorganic pyrophosphatase,sPPase)基因在滇重楼生长发育中的功能,对滇重楼的sPPase基因进行了克隆、序列分析和原核表达研究.方法 根据滇重楼cDNA文库中筛选到的sPPase的EST序列,克隆了滇重楼可溶性无机焦磷酸酶基因PpsPPase的cDNA全长序列;运用生物信息学的方法对该序列进行相似性比较和同源性分析,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析;将PpsPPase插入到原核表达载体pEASY-E1上,并导入到大肠杆菌BL21 (DE3)细胞中进行诱导表达.结果 滇重楼中PpsPPase的开放阅读框ORF为621bp,编码206个氨基酸,与高粱中sPPase的氨基酸序列相似性高为94%;PpsPPase编码的蛋白相对分子质量是23.4kDa,理论等电点pI为5.6,特异识另区域即位于98-104位之间即DNDPMDV.成功构建了原核表达载体pEASY-E1-PpsPPase,并导入到大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,经SDS-PAGE分析表明PpsPPase在大肠杆菌中能够表达,当1PTG诱导2h时表达量较高.结论 首次从滇重楼中克隆得到可溶性无机焦磷酸酶基因PpsPPase,为滇重楼生长发育分子机制的研究提供参考.